Главная Назад


Авторизация
Идентификатор пользователя / читателя
Пароль (для удалённых пользователей)
 

Вид поиска

Область поиска
Найдено в других БД
Формат представления найденных документов:
библиографическое описаниекраткийполный
Поисковый запрос: (<.>S=COCCIDIOIDES POSADASII (FINGI)<.>)
Общее количество найденных документов : 1
1.
РЖ ВИНИТИ 34 (BI14) 08.07-04Б4.188К

    Гришина, М. А.

    Разработка амплификационной тест-системы для идентификации возбудителей кокцидиоидомикоза [Текст] / М. А. Гришина. - Саратов : Рос. н.-и. противочум. ин-т "Микроб", 2006. - 20 с. : ил.
Аннотация: Показано, что 1. На основе нуклеотидных последовательностей, представленных в базе GenBank NCBI, были подобраны родоспецифические праймеры CimMBP1s-CimMBP2as, комплементарные фрагменту гена макрофагсвязанного белка MBP-1, для идентификации Coccidioides immitis и C. posadasii. Для обнаружения C. posadasii сконструированы видоспецифические праймеры CpSOW82s-CpSOW82as, фланкирующие участок гена, кодирующего иммунодоминантный гликопротеин внешней стенки сферул SOWgp82. 2. Для идентификации и дифференциации C. immitis и C. posadasii разработана амплификационная тест-система с двумя парами праймеров CimMBP1s-CimMBP2as и CpSOW82s-CpSOW82as. Подобраны оптимальные условия проведения ПЦР, при соблюдении которых можно обнаруживать возбудителей кокцидиоидомикоза с чувствительностью 1*10{4} артроспор/мл при анализе чистых культур микроорганизмов. 3. Установлена видовая принадлежность исследуемых штаммов возбудителей кокцидиоидомикоза на основании данных рестрикционного анализа хромосомных локусов bl и VL, а также секвенирования фрагментов ДНК, синтезируемых в реакции амплификации с помощью праймеров CimMBP1s-CimMBP2as и CpSOW82s-CpSOW82as. Показано, что штаммы гриба из коллекции музея культур Волгоградского научно-исследовательского противочумного института принадлежат двум видам микроорганизмов - C. posadasii и C. immitis. 4. Показано, что для обеззараживания материала, содержащего возбудителей кокцидиоидомикоза, при исследовании методом ПЦР, может быть использован раствор мертиолята натрия до конечной концентрации 1:1000 с последующим прогреванием проб в течение 40 мин при температуре (56'+-'1)'ГРАДУС'С. Данный способ обеззараживания обеспечивает эффективную инактивацию гриба и позволяет проводить реакцию амплификации без снижения чувствительности метода ПЦР. 5. Подобран эффективный способ выделения ДНК Coccidioides spp. из объектов внешней среды (почвы) и биологического материала, контаминированных артроспорами возбудителя, основанный на гуанидинтиоцианатфенол-хлороформной депротеинизации с последующей очисткой ДНК методом нуклеосорбции. 6. Продемонстрирована возможность использования сконструированной амплификационной тест-системы для специфической детекции C. immitis и C. posadasii с чувствительностью 1*10{4} артроспор/мл при исследовании объектов внешней среды, искусственно контаминированных возбудителями кокцидиоидомикоза. 7. Выявлена диагностическая эффективность разработанной амплификационной тест-системы на основе двух пар праймеров CimMBP1s-CimMBP2as и CpSOW82s-CpSOW82as при анализе биологического материала от животных с экспериментальным кокцидиоидомикодом. Показана возможность использования метода ПЦР для детекции возбудителей кокцидиоидомикоза на ранних сроках инфекционного процесса
ГРНТИ  
ВИНИТИ 341.27.29.25.08
Рубрики: ИНФЕКЦИИ
КОКЦИДИОИДОЛЕЙКОЗ

ВОЗБУДИТЕЛИ

COCCIDIOIDES IMMITIS (FUNGI)

COCCIDIOIDES POSADASII (FINGI)

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ

МЕТОДЫ

ПЦР

ПРАЙМЕРЫ

ВЫБОР

ТЕСТ-СИСТЕМЫ

КОНСТРУИРОВАНИЕ

Свободных экз. нет

 




© Международная Ассоциация пользователей и разработчиков электронных библиотек и новых информационных технологий
(Ассоциация ЭБНИТ)