Главная Назад


Авторизация
Идентификатор пользователя / читателя
Пароль (для удалённых пользователей)
 

Вид поиска

Область поиска
Найдено в других БД
Формат представления найденных документов:
библиографическое описаниекраткийполный
Отсортировать найденные документы по:
авторузаглавиюгоду изданиятипу документа
Поисковый запрос: (<.>S=ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЙ ФРАГМЕНТ SCFV<.>)
Общее количество найденных документов : 2
Показаны документы с 1 по 2
1.
РЖ ВИНИТИ 34 (BI39) 99.12-04К1.64

    Martineau, Pierre.

    Expression of an antibody fragment at high levels in the bacterial cytoplasm [Text] / Pierre Martineau, Peter Jones, Greg Winter // J. Mol. Biol. - 1998. - Vol. 280, N 1. - P117-127 . - ISSN 0022-2836
Перевод заглавия: Экспрессия фрагмента антитела в большом количестве в цитоплазме бактерий
Аннотация: Из-за восстанавливающих условий в цитоплазме рекомбинантные фрагменты антител не образуют междоменные дисульфидные связи, нестабильны и экспрессируются в небольшом кол-ве. Предпринята попытка преодолеть эти ограничения. Выделен одноцепочечный фрагмент антитела scFv (I), связывающийся с мутантной 'бета'-галактозидазой (II) и активирующий ее. Ген I подвергли случайному мутагенезу in vitro в склонной к ошибкам ПЦР и экспрессировали в клетках Escherichia coli мутантные I и указанный мутант II. При посеве на агар с лимитирующей конц-ией лактозы выделены мутанты I с улучшенной экспрессией. После 4 последовательных раундов мутагенеза и селекции выделен вариант I, к-рый экспрессируется в цитоплазме E. coli с выходом 0,5 г/л в жидкой культуре (A[600] = 5,7/ и 3,1 г/л в ферментере - A[600] = 33). Анализ мутантов I показал, что дисульфидные связи восстановлены в цитоплазме и что эти I могут эффективно денатурироваться-ренатурироваться в восстанавливающих условиях in vitro. Великобритания, Cambridge Ctr. for Protein Engineering, Med. Res. Ctr., Cambridge CB2 2QH. Библ. 62
ГРНТИ  
ВИНИТИ 341.43.33.05
Рубрики: АНТИТЕЛА
ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЙ ФРАГМЕНТ SCFV

ГЕНЫ

СЛУЧАЙНЫЙ МУТАГЕНЕЗ

ЭКСПРЕССИЯ ГЕТЕРОЛОГИЧНАЯ

ESCHERICHIA COLI

НАКОПЛЕНИЕ В ЦИТОПЛАЗМЕ

СВОЙСТВА

ФОЛДИНГ


Доп.точки доступа:
Jones, Peter; Winter, Greg


2.
РЖ ВИНИТИ 34 (BI39) 04.02-04К1.31

    Ewert, Stefan.

    Structure-based improvement of the biophysical properties of immunoglobulin V[H] domains with a generalizable approach [Text] / Stefan Ewert, Annemarie Honegger, Andreas Pluckthun // Biochemistry. - 2003. - Vol. 42, N 6. - P1517-1528 . - ISSN 0006-2960
Перевод заглавия: Основанное на структуре усовершенствование биофизических свойств доменов V[H] иммуноглобулина с помощью обобщающих подходов
Аннотация: В систематическом исследовании консенсусных доменов V[H] и V[L] порознь и в составе одноцепочечного фрагмента scFv обнаружены относительно низкий выход экспрессии и низкая кооперативность равновесного разворачивания фрагментов, содержащих домены V[H] эмбриональных клеток человека (семейства 2, 4 и 6). Из анализа упаковки гидрофобного кора, полноты зарядовых кластеров, наличия необразованных H-связей и остатков с низкой тенденцией включения в 'бета'-структуру, положительных углов 'ФИ' и доступных гидрофобных боковых групп ранее были выделены остатки, потенциально ответственные за неудовлетворительные свойства этих последовательностей. Некоторые из них присущи доменам подгрупп с четными номерами, но отсутствуют в нечетных подгруппах. Проведены систематические замены таких остатков по отдельности и в сочетаниях в разных scFv с V[H]6 и изучено их влияние на равновесную стабильность и выход ренатурации. Удалось повысить стабильность на 20,9 кДж/моль и выход при экспрессии в 4 раза и на основании этих данных рационально спроектировать антитела с улучшенными биофизическими свойствами. Спроектированные антитела полностью сохраняют связывающие способности. Швейцария, Biochem. Inst., Univ. Zurich, 8057 Zurich. Библ. 42
ГРНТИ  
ВИНИТИ 341.43.33.05
Рубрики: ИММУНОГЛОБУЛИНЫ
ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫЙ ФРАГМЕНТ SCFV

ДОМЕНЫ V[H]6

ВЫХОД ЭКСПРЕССИИ

РАВНОВЕСНАЯ СТАБИЛЬНОСТЬ

МУТАЦИИ

ВЛИЯНИЕ

ЭМБРИОНАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ

ЧЕЛОВЕК


Доп.точки доступа:
Honegger, Annemarie; Pluckthun, Andreas


 




© Международная Ассоциация пользователей и разработчиков электронных библиотек и новых информационных технологий
(Ассоциация ЭБНИТ)