СибНСХБ

Вид поиска

Область поиска

Найдено в других БД

Формат представления найденных документов:
библиографическое описание	краткий	полный

Поисковый запрос: (<.>S=СИСТЕМА ТРАНСПОЗИЦИИ<.>)

Общее количество найденных документов : 1

РЖ ВИНИТИ 34 (BI11) 09.07-04Б1.30

Использование системы транспозиции бактериофага Mu для интеграции рекомбинантной ДНК в хромосому Methylophilus methylotrophus [Текст] / Е. Г. Абалaкина [и др.] // Биотехнология. - 2008. - N 3. - С. 13-26 . - ISSN 0234-2758
Аннотация: Система транспозиции бактериофага Mu успешно адаптирована для интеграции фрагментов рекомбинантной ДНК в геном Methylophilus methylotrophus. Эта система включает две плазмиды, способные к RP4-зависимому мобилизационному переносу из E. coli в M. methylotrophus. Первая, хлеперная, плазмида имеет репликон широкого круга хозяев и содержит термоиндуцибельные гены факторов транспозиции фага Mu (MuA и MuB). Осуществлено конструирование двух вариантов хелперных плазмид на основе как стабильного, так и нестабильного в клетках метилотрофов репликонов. Вторая, интегративная, плазмида системы способна к автономной репликации лишь в E. coli, но не в M. methylotrophus, и имеет в своем составе mini-Mu-транспозон с концевыми фрагментами ДНК фага Mu (Mu-attL и Mu-attR) и участками расщепления рестриктазами для встраивания целевых генов. В качестве модельного целевого гена в состав mini-Mu-транспозона бы введен маркер устойчивости к канамицину, фланкированный участками FRT [FRT-Km{8}-FRT]. При мобилизационном RP4-зависимом переносе интегративной плазмиды из E. coli в клетки M. methylotrophus, содержащие любой из двух вариантов хелперной плазмиды, в условиях термоиндукции mini-Mu-транспозон интегрируется в хромосому метилотрофов с высокой эффективностью. Показано, что основным механизмом функционирования mini-Mu-транспозона в клетках метилтрофов в данной системе является репликативная транспозиция. В то же время в клетках E. coli при использовании аналогичной системы, но с автономно реплицирующимися в этом организме интегративными плазмидами, основным путем транспозиции mini-Mu являлась прямая интеграция в бактериальный геном. Выбор альтернативных механизмов транспозиции в двух аналогичных системах может объясняться различием топологии интегративных плазмид в процессе формирования структуры транспозосомы, обусловленной их способностью или неспособностью к репликации. Показано, что маркер [FRT-Km{R}-FRT], использованный для селективности процесса интеграции mini-Mu-транспозона в хромосому метилотрофов, при необходимости может быть удален из бактериального генома на завершающем этапе эксперимента с помощью адаптированной для M. methylotrophus системы FLP-FRT-зависимой рекомбинации 2 'мю' плазмиды дрожжей Saccharomycs cerevisiae. Следовательно, созданные в работе системы могут быть использованы для клонирования и последующей Mu-зависимой интеграции различных генов в хромосому M. methylotrophus с возможностью селективного отбора целевых интегрантов и получения в конечном итоге штаммов, не содержащих в своем геноме маркеров устойчивости к антибиотику. Россия, Закрытое Акционерное Общество "НИИ Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ"), Москва. Библ. 24

ГРНТИ	34.25.05

ВИНИТИ 341.25.05.39
Рубрики: METHYLOPHILUS METHYLOTROPHUS (BACT.)
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ
ИНТЕГРАЦИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК
В ХРОМОСОМУ
БАКТЕРИОФАГ МЮ
СИСТЕМА ТРАНСПОЗИЦИИ
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ
УДАЛЕНИЕ МАРКЕРА СЕЛЕКЦИИ

Доп.точки доступа:
Абалaкина, Е.Г.; Токмакова, И.Л.; Горшкова, Н.В.; Смирнов, С.В.; Ахвердян, В.З.; Машко, С.В.; Йомантас, Ю.В.

"Электронные каталоги и базы данных библиотек СО РАН"

© Международная Ассоциация пользователей и разработчиков электронных библиотек и новых информационных технологий
(Ассоциация ЭБНИТ)

rtvarBDview(" результаты поиска","20190607010228","4682442");

Вид поиска